Unidad de Cultivos Celulares
Presentación
El centro fue creado en 1990 con el fin de ofrecer apoyo a los investigadores en el uso de los cultivos de células animales, estando incluido en la Red de Laboratorios e Infraestructuras de la Comunidad de Madrid.
La mayoría de los proyectos de investigación biológica conllevan la necesidad de utilizar cultivos celulares de distinta naturaleza; de ahí, la necesidad de contar con unas instalaciones apropiadas que contengan un aparataje común para todos los usuarios. Este centro de apoyo pone a disposición de la comunidad universitaria, así como de otras instituciones públicas y privadas, la posibilidad de cultivar todo tipo de células animales, tanto cultivos primarios como líneas celulares establecidas, y el empleo de diferentes técnicas que permitan su estudio y caracterización a nivel molecular y celular. Así mismo, se ofrecen una serie de servicios como microscopia confocal, citometría de flujo y ensayos de citotoxicidad.
La Unidad de Cultivos Celulares participa en NANBIOSIS, clúster de equipamiento científico-tecnológico de alto nivel puesto a disposición de la comunidad científica de sectores públicos y privados, constituyendo la Unidad 17 “Servicio de Microscopia confocal” de dicha institución
Servicios especializados
- Facilitar a los usuarios el uso y aprovechamiento de las instalaciones de que dispone.
- Asesorar en las condiciones particulares para el cultivo de células específicas.
- Informar de la disponibilidad de bancos de células, comerciales o no.
- Mantenimiento de líneas celulares en Biobanco en vapor de nitrógeno.
- Manteamiento de la infraestructura para su correcto funcionamiento y posterior uso por parte de los investigadores.
- Dar soporte investigador a los diferentes equipos de Investigación.
- Asesorar en la realización de ensayos de citometría y microscopia confocal. Elección de anticuerpos, fluorocromos y sondas para las diferentes aplicaciones.
- Prestar servicio a centros públicos o empresas privadas en el marco de convenios o acuerdos que se establezcan.
- Asesoramiento en el uso de la infraestructura de la Unidad, así como de las técnicas más usuales en cultivos celulares.
Aplicaciones
- Ensayos de Citometría de Flujo: análisis de ciclo celular, apoptosis, producción de radicales libres, inmunofenotipaje, proliferación CSFE y BrdU, receptores, etc.
- Estudios de Microscopia Confocal con diferentes fluorocromos, anticuerpos y sondas fluorescentes: FITC, Rhodamina, TRITC, Alexa -488, Alexa 633, etc. Ensayos in vivo.
- Utilización de la Infraestructura necesaria para el trabajo de cultivos celulares de forma autónoma por el usuario.
- Realización de curvas de crecimiento, proliferación y pruebas de citotoxicidad.
- Preparación de placas de agar y medios de uso en Microbiología.
- Filtración de medios termolábiles para su esterilización.
- División y mantenimiento de cultivos celulares por técnico especializado.
- Congelación de células y mantenimiento en Banco de Células mediante nitrógeno líquido.
- Fotografía Digital de microscopia óptica y de fluorescencia de los cultivos celulares.
- Esterilización de material de uso frecuente en cultivos. Autoclave y esterilización por plasma.
- Preparación de muestras para histología: procesador de muestras automatizado, estación de parafina, micrótomo y diferentes tinciones. Tanto por parte del usuario como por el técnico especialista.
Equipamiento
- Microscopio Confocal LEICA TCS-SP5
- Láser Argón: 488 nm.
- Láser Helio-Neón: 561 nm.
- Láser Helio-Neón: 633 nm.
- Láser UV: 405 nm.
- Posibilidad de ensayos in vivo.
- Citómetro de flujo MACSQuant Analyzer 10
- Láser Violeta 405 nm de excitación. Detectores V1/V2.
- Láser Argón (Azul) 488 nm de excitación. Detectores B1/B2/B3/B4.
- Láser Rojo 633 nm de excitación. Detectores R1/R2.
- Microscopio invertido de contraste de fases (NIKON).
- Microscopio directo OPTIKA, objetivos 4x/10x/20x/100x. Preparaciones histológicas.
- Microscopio de fluorescencia Leica DM IL LED. Con objetivos 5x/10x/20x/40x. Canales para fluorescencia azul (DAPI) /verde (FITC, GFP, etc.) y rojo (Rodamina, etc.). Sistema de captación de imágenes y software de análisis.
- Incubador CO2/Temperatura, para mantenimiento de cultivos celulares (3 unidades).
- Cabina de flujo vertical (2) (TELSTAR).
- Cabina de Flujo de Bioseguridad (TELSTAR).
- Cabina de Flujo horizontal para preparación de medios (TELSTAR).
- Agitador orbital (LAB-LINE).
- Cito centrífuga (THERMO).
- Centrifuga refrigerada en sala de cultivos. Marca Eppendorf (modelo 5810R), con adaptadores para diferentes tipos de tubos y para placas de cultivo.
- Electroporador BTX600.
- Lector de placas FLUOstar Omega: absorbancia (todas las longitudes de onda) / fluorescencia (355-20/460; 544/590-10; 485-12/EM520) / TR-EX (em. 645-20)
- Espectrómetro UV visible.
- Contenedor de nitrógeno (vapor) CBS-1500-Eurocyl 180 (banco de células).
Contador automático de células COUNTESS (Invitrogen).
Solicitud de servicios
La reserva de equipos se realizará a través de la plataforma @LIMS.
En caso de duda o para cualquier consulta contactar telefónicamente ((+34) 91 885 45 35) o por email (unidad.cultivos@uah.es).
